IF=8宇玫博外泌體提取試劑盒助力哮喘氣道上皮屏障破壞研究!
近期,來自山西醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院的張志紅教授團(tuán)隊(duì)在Journal of environmental management雜志發(fā)表了題為“Exosomal miR-129-2-3p promotes airway epithelial barrier disruption in PM2.5-aggravated asthma.”的科研論文,IF=8。
研究背景:
PM2.5是直徑小于2.5微米的細(xì)顆粒物,能夠通過呼吸進(jìn)入人體,沉積在呼吸道和肺部,甚至進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng),對(duì)多個(gè)器官系統(tǒng)造成損害。哮喘是一種常見的慢性氣道疾病,以可逆性氣流阻塞、慢性氣道炎癥、粘液分泌和氣道重塑。哮喘的病理生理特征是慢性氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性、氣道重塑和氣道上皮屏障功能受損。氣道上皮細(xì)胞是機(jī)體抵御外部過敏原等危險(xiǎn)因素的第一道物理防御屏障,它的結(jié)構(gòu)和功能缺陷可加重哮喘。研究表明,哮喘患者血清外泌體miRNA-125b水平與健康對(duì)照組相比明顯升高,許多外泌體microRNAs (miRNAs)已成為診斷哮喘的潛在生物標(biāo)志物;而PM2.5可通過破壞氣道上皮屏障和提高細(xì)胞間通透性來加劇哮喘。但關(guān)于PM2.5誘導(dǎo)外泌體miRNA加劇哮喘的作用機(jī)制和靶基因尚不清楚。miR-129-2-3p是由18-22個(gè)核苷酸組成的單鏈小分子RNA,通過與靶mRNA的3′非翻譯區(qū)結(jié)合,抑制mRNA的降解或翻譯,從而抑制基因表達(dá)。
研究成果及意義:
在本研究中,作者選取了健康對(duì)照組和哮喘患者支氣管上皮細(xì)胞,采用生物信息學(xué)方法篩選出表達(dá)量較高的miR-129-2- 3p,隨后建立了PM2.5加重哮喘的小鼠模型,通過透射電鏡、蛋白質(zhì)印跡和納米顆粒跟蹤分析實(shí)驗(yàn)得出在哮喘患者的血漿外泌體、小鼠肺組織和PM2.5刺激的人支氣管上皮細(xì)胞(16HBE)外泌體中,miR-129-2-3p的表達(dá)水平顯著升高,且與PM2.5暴露水平呈正相關(guān)。PM2.5誘導(dǎo)的外泌體能夠降低16HBE細(xì)胞中緊密連接蛋白ZO-1、occludin和E-cadherin的水平,增加細(xì)胞通透性,并促進(jìn)炎癥因子IL-6、IL-8和TNF-α的分泌。接著作者通過雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)和RNA免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),TIAM1是miR-129-2-3p的靶基因,miR-129-2- 3 p通過抑制其靶基因(TIAM 1)促進(jìn)氣道上皮屏障損傷,敲除miR-129-2- 3p可以改善氣道上皮屏障的完整性,miR-129-2-3p通過抑制TIAM1/RAC1/PAK1信號(hào)通路,加劇了PM2.5誘導(dǎo)的氣道上皮屏障功能障礙。作者最終認(rèn)為,PM2.5誘導(dǎo)的外泌體miR 129 -2- 3 p通過靶向TIAM 1/RAC 1/PAK 1信號(hào)通路破壞了氣道上皮屏障功能,加劇了哮喘癥狀;而敲除miR 129 -2- 3 p可以修復(fù)屏障功能障礙。該研究表明外泌體miRNA是哮喘治療的一種新模式,外泌體miR-129-2-3p可能成為哮喘診斷的潛在生物標(biāo)志物和治療該病的有效靶點(diǎn)。
該研究中使用本公司細(xì)胞上清外泌體提取試劑盒(UR52121)進(jìn)行16HBE細(xì)胞外泌體的分離純化,結(jié)果符合各檢測(cè)指標(biāo)要求,滿足了客戶的下游實(shí)驗(yàn)需求。


該研究中使用本公司外泌體綠色熒光標(biāo)記染料(PKH67)(UR52303)標(biāo)記16HBE細(xì)胞外泌體。將染色的Exos與16HBE細(xì)胞共孵育12小時(shí),并通過熒光顯微鏡在細(xì)胞質(zhì)中觀察到PKH67染色的Exos的存在,表明Exos被正常16 HBE細(xì)胞吸收。
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外泌體綠色熒光標(biāo)記染料(PKH67)-企業(yè)官網(wǎng)
參考文獻(xiàn): Exosomal miR-129-2-3p promotes airway epithelial barrier disruption in PM2.5-aggravated asthma[J]. Journal of Environmental Management, 2024, 370: 123053.