其本質(zhì)為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養(yǎng)物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎(chǔ)上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細(xì)胞培養(yǎng)基被不斷開發(fā)出來。常用合成培養(yǎng)基的配方此處不詳細(xì)介紹。MEM(MinimalEssentialMedium)培養(yǎng)基MEM(MinimalEssentialMedium)培養(yǎng)基有含Earle's平衡鹽的類型,也有含Hanks'平衡鹽的類型;有高壓滅菌型的,也有過濾除菌型的;還有含非必需氨基酸的類型。是基本、適用范圍廣的細(xì)胞培養(yǎng)基。DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良獲得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種類型。細(xì)胞生長快。附著稍差的腫瘤細(xì)胞、克隆培養(yǎng)用高糖效果較好,常用于雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)。IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基IMDM(Iscove’smodifiedDMEM)是由Iscove在DMEM基礎(chǔ)上改良,增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等??捎糜陔s交瘤細(xì)胞培養(yǎng),以及無血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基專門針對淋巴細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計,含有BSS、21種氨基酸、維生素等,適于多種正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng),也用做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。HamF12細(xì)胞培養(yǎng)基含微量元素。Eagle培養(yǎng)基是一種基本、適用范圍廣的培養(yǎng)基,是動物細(xì)胞培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基之一。黑龍江實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)基源頭直供

干細(xì)胞研究同樣與 DMEM 培養(yǎng)基緊密相連。DMEM 培養(yǎng)基能夠?yàn)楦杉?xì)胞群體的維持和擴(kuò)增提供適宜環(huán)境。以胚胎干細(xì)胞為例,高糖型 DMEM 培養(yǎng)基憑借充足的能量供應(yīng),助力胚胎干細(xì)胞保持良好的生長狀態(tài),維持其多能性。在誘導(dǎo)干細(xì)胞分化為特定細(xì)胞類型時,科研人員可根據(jù)需求對 DMEM 培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化,添加特定的生長因子等成分,引導(dǎo)干細(xì)胞向目標(biāo)細(xì)胞分化。比如,在神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元細(xì)胞分化的研究中,通過調(diào)整 DMEM 培養(yǎng)基成分,促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞的分化進(jìn)程,為神經(jīng)再生醫(yī)學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。廣西DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基廠家TNM-FH昆蟲培養(yǎng)基是改進(jìn)的Grace’s昆蟲培養(yǎng)基,適當(dāng)補(bǔ)充添加劑后,可用于各種鱗翅類昆蟲細(xì)胞的培養(yǎng)。

可在血清含量低時用,適用于克隆化培養(yǎng)。F12適用于CHO細(xì)胞,也是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基將DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后營養(yǎng)成份豐富,血清使用量也減少。常作為開發(fā)無血清細(xì)胞培養(yǎng)基時的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,細(xì)胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清,這樣才能維持細(xì)胞活力,促進(jìn)細(xì)胞增殖。針對不同的動物細(xì)胞,現(xiàn)已開發(fā)了多種商業(yè)化、個性化的低血清細(xì)胞培養(yǎng)基配方,營養(yǎng)成份更加豐富,血清使用量可降低至1~3%,由此可減少了血清等動物來源成份對生物制品安全性的影響。無血清細(xì)胞培養(yǎng)基(serumfreemedium,SFM)經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢。采用無血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,簡化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,達(dá)到既能滿足動物細(xì)胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來的,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進(jìn)型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基**初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和*細(xì)胞的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和*細(xì)胞,是使用**為***的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨(dú)特的效果,是因?yàn)槠渲泻羞€原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素、維生素B12以及PABA,這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。即用型DMEM/F12,確保細(xì)胞活力與實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性。

1.細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份,參與細(xì)胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強(qiáng),適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點(diǎn)是營養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,但缺點(diǎn)是成分復(fù)雜,來源受限且制作過程復(fù)雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。貴州華晨陽細(xì)胞培養(yǎng)基廠家直銷
Ham’sF-10營養(yǎng)混合物(Ham’sF-10Nutrient Mixture)是由Ham針對CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)設(shè)計出的一種培養(yǎng)基。黑龍江實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)基源頭直供
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基是改進(jìn)型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和ai細(xì)胞的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞,是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一種高級細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,可直接替代細(xì)胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細(xì)胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,不會自發(fā)的降解。 黑龍江實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)基源頭直供
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