為何定制化試劑盒是宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測的優(yōu)先選擇？特定工藝來源的抗原與校準(zhǔn)品更具代表性，是重要原因之一。不同生物制品的上游生產(chǎn)工藝存在差異，比如培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、收獲時(shí)機(jī)等不同，都會(huì)使產(chǎn)生的 HCP 在蛋白種類、豐度及翻譯修飾上出現(xiàn)區(qū)別，進(jìn)而導(dǎo)致進(jìn)入下游純化工藝的 HCP 類型相應(yīng)改變 —— 尤其是與藥物主成分共同純化的 HCP，會(huì)以優(yōu)勢蛋白的形式存在于藥物原液或制劑中。HCP 定制化 ELISA 檢測試劑盒通常選用實(shí)際生產(chǎn)工藝中上游發(fā)酵后的樣品制備抗原與校準(zhǔn)品，這樣制得的校準(zhǔn)品能較充分地體現(xiàn)實(shí)際工藝中的 HCP，有效降低因抗原或校準(zhǔn)品種類不足引發(fā)的漏檢風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)減少定量不準(zhǔn)確的問題。

在宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測方面，工藝特異型檢測試劑盒（upstream-process）專門針對特定生產(chǎn)工藝設(shè)計(jì)，其關(guān)鍵特征是依托產(chǎn)物的實(shí)際宿主細(xì)胞開展開發(fā)及驗(yàn)證，通過模擬真實(shí)生產(chǎn)流程制備廣譜 HCP 抗原，且要求抗血清具備高覆蓋率以適配工藝變動(dòng)，從而保障對特定生產(chǎn)流程中 HCP 殘留的高度準(zhǔn)確監(jiān)控。平臺(tái)型檢測試劑盒（platform）則由生產(chǎn)商圍繞特定表達(dá)宿主細(xì)胞及相近工藝自主開發(fā)，優(yōu)勢體現(xiàn)在能借助相同參考標(biāo)準(zhǔn)品與試劑，統(tǒng)一監(jiān)測基于該宿主細(xì)胞生產(chǎn)的不同產(chǎn)品，適用于上游工藝足夠相似的產(chǎn)品線。通用型檢測試劑盒（commercial）屬于市售廣譜檢測方案，適合相似宿主細(xì)胞的常規(guī) HCP 檢測；但由于其制備過程未必能完全模擬目標(biāo)產(chǎn)物的實(shí)際生產(chǎn)場景，因此需嚴(yán)格評估多克隆抗體對特定產(chǎn)品 HCP 的覆蓋率，以此確保檢測結(jié)果的可靠性。這三類試劑盒覆蓋了從深度定制到通用篩查的各類 HCP 檢測需求。

湖州申科生物推出的宿主細(xì)胞殘留蛋白檢測全自動(dòng) ELISA 分析系統(tǒng)，集成了標(biāo)曲制備、樣本加樣、恒溫孵育、板孔清洗及結(jié)果檢測等全流程操作功能。系統(tǒng)配備的高精度前處理模塊與檢測模塊，能通過準(zhǔn)確控制實(shí)驗(yàn)參數(shù)，切實(shí)降低人為操作誤差，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性與準(zhǔn)確性。該系統(tǒng)采用多模塊單獨(dú)運(yùn)行設(shè)計(jì)，可實(shí)現(xiàn)不同檢測任務(wù)的并行處理，大幅縮短實(shí)驗(yàn)周期，提升整體實(shí)驗(yàn)效率。在保障結(jié)果可靠性的前提下，系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了 ELISA 實(shí)驗(yàn)的自動(dòng)化操作、流程標(biāo)準(zhǔn)化與結(jié)果快速輸出，降低了對實(shí)驗(yàn)人員的技能要求，同時(shí)通過優(yōu)化資源配置降低檢測成本。此外，系統(tǒng)內(nèi)置完善的數(shù)據(jù)管理功能，可滿足實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)完整記錄與全流程審計(jì)追蹤的需求，嚴(yán)格契合 21 CFR Part 11 法規(guī)要求，且配備三級權(quán)限管理機(jī)制，進(jìn)一步保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的安全性與規(guī)范性。

宿主細(xì)胞蛋白（HCPs）是生物制品生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的重要工藝相關(guān)雜質(zhì)，不僅可能引發(fā)患者不良免疫反應(yīng)、超敏反應(yīng)，還可能造成產(chǎn)品蛋白降解等問題，進(jìn)而影響生物制品的安全性與有效性，因此成為生物制品質(zhì)量控制中的關(guān)鍵指標(biāo)。目前 HCPs 殘留檢測的常用方法為 ELISA 法，該方法操作簡便、靈敏度高且檢測通量較高，是 HCPs 殘留的日常放行檢測方法，各國藥典均對采用酶聯(lián)免疫法開展 HCPs 殘留檢測作出規(guī)定。不過，采用 ELISA 法檢測 HCPs 殘留仍存在不少挑戰(zhàn)：在實(shí)際生產(chǎn)工藝中，宿主細(xì)胞來源、生產(chǎn)工藝路線、純化技術(shù)、生產(chǎn)規(guī)模等因素，均可能改變 HCPs 的種類與復(fù)雜程度，給檢測帶來不確定性。

為何定制化試劑盒會(huì)成為宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測的優(yōu)先選擇？關(guān)鍵原因與檢測準(zhǔn)確性、藥物安全性緊密關(guān)聯(lián)。HCP ELISA 檢測屬于多分析物檢測技術(shù)，其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，高度依賴校準(zhǔn)品品質(zhì)、抗體質(zhì)量及檢測方法的構(gòu)建。定制化 HCP ELISA 檢測試劑盒的主要優(yōu)勢，在于其依托更具代表性的 HCP 抗原對動(dòng)物進(jìn)行免疫，由此制備的 HCP 抗體針對性更突出。這類針對性抗體可大幅降低 HCP 漏檢風(fēng)險(xiǎn)，特別是針對生產(chǎn)工藝中特有的高風(fēng)險(xiǎn) HCP 因子，能呈現(xiàn)更優(yōu)的檢出成效，為藥物的安全性、有效性及質(zhì)量可控性提供堅(jiān)實(shí)保障。

畢赤酵母（Pichia pastoris）作為第二代酵母表達(dá)系統(tǒng)的代表性菌株，已被美國 FDA 認(rèn)定為 GRAS（一般認(rèn)為安全）級微生物，具備表達(dá)水平高、產(chǎn)物活性優(yōu)、培養(yǎng)成本低、易于擴(kuò)大至工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)勢。在生物制藥領(lǐng)域，酶制劑、胰島素、表皮生長因子、膠原蛋白等多款生物制劑，已借助畢赤酵母系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)。和其他產(chǎn)品雜質(zhì)類似，畢赤酵母宿主殘留蛋白（HCP）可能對生物制品的安全性與有效性造成不利影響，故而在生產(chǎn)監(jiān)測、產(chǎn)品放行等環(huán)節(jié)中，需對其開展定量研究并實(shí)施嚴(yán)格控制。SHENTEK^® 畢赤酵母 HCP 殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），是湖州申科生物自主研發(fā)的畢赤酵母 HCP 通用檢測試劑盒，不僅擁有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，還實(shí)現(xiàn)了關(guān)鍵試劑的全國產(chǎn)化。該試劑盒適用于對 GS115、X33 等畢赤酵母菌株生產(chǎn)的生物制品中宿主殘留蛋白進(jìn)行定量檢測，具有操作步驟少、檢測速度快、專一性強(qiáng)、性能穩(wěn)定可靠的特點(diǎn)。